איך מעמיסים אלקטרופורזה בג'ל?

2024 מְחַבֵּר: Miles Stephen | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-15 23:36

טעינת דגימות והפעלת ג'ל אגרוז:

1. לְהוֹסִיף טוען חוצץ לכל אחת מדגימות ה-DNA שלך.
2. לאחר שהתמצק, מניחים את האגרוז לְהַגלִיד לתוך ה לְהַגלִיד קופסא ( אלקטרופורזה יחידה).
3. למלא לְהַגלִיד קופסה עם 1xTAE (או TBE) עד ל- לְהַגלִיד מכוסה.
4. בקפידה לִטעוֹן סולם משקל מולקולרי לתוך הנתיב הראשון של לְהַגלִיד .

לגבי זה, כמה DNA אתה צריך לטעון עבור אלקטרופורזה ג'ל?

הסכום של DNA לטעינה לכל באר משתנה. הכמות הנמוכה ביותר של DNA שניתן לזהות עם אתידום ברומיד הוא 10 ננוגרם. DNA כמויות של עד 100 ננוגרם לבאר יגרמו לרצועה חדה ונקייה על אתידיום ברומיד מוכתם לְהַגלִיד.

בנוסף, מדוע משתמשים במאגר באלקטרופורזה של ג'ל במקום במים? ה בַּלָם יש צורך לשמור על ה-pH של תמיסת ה-DNA קרוב לרמה ניטרלית, כי אם הוא יכול להפוך לחומצי באמצעות אלקטרוליזה. הזרמים החשמליים הנגרמים על ידי האלקטרודות יכולים לגרום מים מולקולות להתנתק ולשחרר יוני H+.

אנשים גם שואלים, מדוע משתמשים בסמן באלקטרופורזה של ג'ל?

שברים קטנים יותר נעים מהר יותר, ולפיכך רחוק יותר, מאשר שברים גדולים יותר כשהם מתפתלים דרך לְהַגלִיד . מדוע משתמשים בסמן בעת הפעלת השברים דרך ה לְהַגלִיד ? א סַמָן מכיל שברי DNA בגודל ידוע. סמנים מופעלים בכל לְהַגלִיד להשוואה עם השברים הלא ידועים באחרים לְהַגלִיד נתיבים.

כמה DNA ניתן לראות על ג'ל אגרוז?

רוב ג'ל אגרוז נעשים בין 0.7% ל-2%. 0.7% ג'ל יהיה להראות הפרדה טובה (רזולוציה) של גדול DNA קטעים (5-10 קילו-בייט) ו-2% ג'ל יהיה הצג רזולוציה טובה עבור שברים קטנים (0.2-1 קילו-ביט).