איך מוצאים את ריכוז ה-DNA מהספיגה?

2024 מְחַבֵּר: Miles Stephen | [email protected]. שונה לאחרונה: 2023-12-15 23:36

ריכוז DNA מוערך על ידי מדידת ה ספיגה ב-260nm, התאמת ה-A₂₆₀ מדידה עבור עכירות (נמדדת על ידי ספיגה ב-320nm), הכפלה בגורם הדילול, ושימוש בקשר ש-A₂₆₀ של 1.0 = 50 מיקרוגרם/מ ל dsDNA טהור.

כמו כן, אנשים שואלים, איך מוצאים את ריכוז ה-DNA?

כדי לקבוע את ריכוז ה-DNA בדגימה המקורית, בצע את החישוב הבא:

1. ריכוז dsDNA = 50 מיקרוגרם/מ"ל × OD₂₆₀ × מקדם דילול.
2. ריכוז dsDNA = 50 מיקרוגרם/מ"ל × 0.65 × 50.
3. ריכוז dsDNA = 1.63 מ"ג/מ"ל.

כמו כן, מהו ריכוז DNA טוב? א טוֹב איכות DNA לדוגמא צריכה להיות A₂₆₀/א₂₈₀ יחס של 1.7-2.0 ו-A₂₆₀/א₂₃₀ יחס של יותר מ-1.5, אך מכיוון שהרגישות של טכניקות שונות למזהמים אלו משתנה, יש לקחת ערכים אלה רק כמדריך לטוהר הדגימה שלך.

בדרך זו, האם ה-DNA סופג ב-280 ננומטר?

יחס הספיגה ב-260 נ מ לעומת 280 ננומטר זה משמש בדרך כלל להערכה DNA זיהום של תמיסות חלבון, שכן חלבונים (במיוחד, חומצות האמינו הארומטיות) לִסְפּוֹג אור ב 280 ננומטר.

איך משתמשים ב-NanoDrop לריכוז DNA?

בעצם ה ננו-דרופ נותן לך את האפשרות לבחור DNA , RNA, חלבונים. אתה צריך לבחור DNA , לאחר מכן מניחים 2 ΜL של מים (מילי Q מועדף) בחר "ריק" לאחר מכן מקם עוד 2 ΜL מים כדי לאשר שהמידה היא 0. לאחר מכן הנח 2 ΜL מהדגימה שלך. תקבל את המדידה.